脂质体介导马立克病病毒DNA转染鸡胚成纤维细胞     

刘红梅  叶建强  秦爱建  祁克宗 《动物医学进展》2006,27(2):97-98

利用粗提的马立克病病毒(MDV)CVI988感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)总DNA与脂质体包裹转染CEF,获得具有感染性的MDV。结果表明,使用3μg MDV感染的CEF总DNA转染CEF,6 d~7 d后可形成0~16个MDV特有空斑。  相似文献   

从牛奶中分离DNA方法的建立   总被引：7，自引：0，他引：7  

田雨 《乳业科学与技术》2006,28(3):112-113

本文通过将牛奶中提取白细胞技术和热裂解提取DNA技术相结合建立了从牛奶中提取DNA的技术程序。结果显示，提取DNA原液的平均浓度为0．5μg／mL。通过PCR分析发现，提取DNA的浓度已达到PCR反应的模板要求，可以作为一种快速的DNA提取方法。  相似文献   

瘤胃微生物总DNA快速提取法研究     

淡瑞芳  龙瑞军  杨予海 《家畜生态》2006,(1)

本文介绍了一种简便快速地提取瘤胃微生物细胞总DNA的方法,该法是对提取植物的CTAB法进行改进而成。与经典反复冻融 SDS/蛋白酶K裂解法相比,该法可在数小时内高效地提取瘤胃内容物总DNA,经琼脂糖凝胶电泳对所提取瘤胃微生物总DNA进行检测,证明所获得的瘤胃总DNA符合分子生物学操作要求。  相似文献   

用改进的酚-氯仿法提取鱼类基因组DNA效果的分析     

马洪雨  郭金峰  岳永生 《家畜生态》2006,(2)

提取鱼类基因组DNA的研究报道并不多见,效果也各有差异。本文以泰山螭霖鱼、东平湖鲤鱼、东平湖鲫鱼为材料,采用改进的酚-氯仿法提取基因组DNA,并进行了紫外分光光度、琼脂糖凝胶电泳、微卫星PCR扩增等方法的鉴定。结果表明,本方法提取的基因组DNA浓度在0.9μg/μL~3.25μg/μL之间,A260/A280比值在1.79~1.87之间,电泳条带整齐明亮,适合微卫星PCR扩增,且整个操作过程使用试剂较少,简单易行。  相似文献   

猪泛素基因与PRRSV GP5基因融合表达质粒的构建及其免疫效果     

侯艳红周艳君  闫丽萍田志军杨汉春  童光志 《中国兽医科技》2007,37(5):413-418

构建了泛素（ubiquitin，Ub）基因与密码子优化的PRRSVGP5蛋白（optiGP5）基因融合表达质粒pIR—Ub—optiGP5。间接免疫荧光和Western—blot分析表明，重组质粒转染293T细胞后能够瞬时表达。将pIR—optiGP5和pIR—Ub—optiGP5两种质粒DNA肌肉注射免疫BALB／c小鼠后，分别检测小鼠血清中抗GP5抗体、T淋巴细胞的增殖能力以及CTL活性。结果显示，pIR—optiGP5质粒免疫组在二免后可以检测到荧光抗体，而pIR—Ub—optiGP5质粒免疫组一直未检测到抗GP5抗体，但该免疫组的T淋巴细胞增殖指数及针对GP5的特异性CTL反应数值明显高于pIR—optiGP5质粒免疫组。这表明泛素与GP5的融合表达可增强细胞免疫反应。  相似文献   

贵州威宁黄牛线粒体DNA D-loop区全序列分析     

刘若余  杨公社  夏先林  刘培琼  张明忠  雷初朝 《中国牛业科学》2006,33(1):14-16

为了解贵州威宁黄牛的遗传多样性及遗传背景，我们分析测定了19个个体线粒体DNA D-loop区序列。结果检测到8种单倍型，7种为普通牛血统的单倍型，1种为瘤牛血统的单倍型，表明威宁黄牛同时受普通牛和瘤牛的影响。本研究同时构建了19个威宁黄牛个体的系统发生树，结果发现它们明显分为普通牛血统单倍型组和瘤牛血统单倍型组两组。  相似文献   

草原红牛及其杂交群体中微卫星DNA多态性研究     

赵玉民  杨国忠  任文陟  张嘉保  胡成华  张国梁 《中国牛业科学》2006,32(6):34-37

选用草原红牛及其与利木赞牛的杂交后代66头作为试验牛群体,提取血液及肝脏基因组DNA,设计8对微卫星引物进行PCR扩增,从分子水平上对草原红牛及其杂交群体8个位点的遗传多态性进行微卫星分析。结果表明,在草原红牛中,ETH225、IDVGA2、IDVGA46和IDVGA44等位基因数分别为5、4、3和4,多态信息含量(PIC)分别为0．5420、0．6736、0．5218和0．5750,这4个位点均为高度多态。而另4个位点BM2113、BM1824、IDVGA55和TGLA44等位基因数分别,2、2、2和5,多态信息含量分别为0．3698、0．3604、0．3538和0．4708,属于中度多态性位点。在杂交牛群体中,BM2113、ETH225、IDVGA2、IDVGA46、ID- VGA44、BM1824、IDVGA55和TGLA44这8个位点的等位基因数分别为4、5、4、4、5、4、4和6,多态信息含量(PIC)分别为0．6432、0．5943、0．6593、0．5794、0．7259、0．6121、0．6120和0．6204,杂合度为0．7034,均属于高度多态性位点。这些微卫星位点作为遗传标记应用于草原红牛遗传育种研究之中是可行的。  相似文献   

Whole Genome Methylation Variation Analysis of Longissimus Dorsi Between Tan Sheep and Hu Sheep     

YUE Caijuan  LIANG Xiaojun  WANG Xiuqin  MA Qing  MA Jifeng  ZHANG Junli  WANG Xiaowei  Eerhehua 《中国畜牧兽医》2007,47(10):3058-3068

It aimed to identify the differential methylation region (DMR) and differential methylation gene (DMG) through the analysis of the genome-wide methylation difference of the longest muscle of the sheep's back of different breeds of sheep,and laid the foundation for the analysis of the differences in sheep skeletal muscle development.In this study,one-year-old sheep(Tan sheep and Hu sheep and Tan-Hu F2) were sanned by the whole genome bisulfite sequencing method(WGBS).The degree of methylation and differentially methylated region in the whole genome DNA of longissimus dorsi(LD) muscle were studied to explore the difference of DNA methylation in level in sheep.The results showed that the methylation (mC) rates of cytosine (C) were 3.55%,3.18% and 3.56% in Tan sheep,Hu sheep and Tan-Hu F2,respectively.A total of 97 731 DMRs and 10 784 related DMGs were detected.In CG,CHH and CHG sequences,the methylation levels of the three groups were not significantly different.419 GO terms and 20 related signal pathways were detected by GO and KEGG analysis,respectively,which were showed to be significantly enriched in cellular process,cell part,binding,long-term depression,and so on.Five candidate genes,ACTA2、ROCK1、CALD1、MYH3 and MYH10 were sreened out in muscle tissues.This study provided genome-wide methylation of pattern of three groups (Tan sheep and Hu sheep and Tan-Hu F2).The results provided reference information for the epigenetic study of Tan sheep and screened candidate genes related to muscle development and meat quality.  相似文献   

表达禽流感病毒H5HA、H7HA基因DNA疫苗的免疫原性研究     

张芳芳  姜永萍  刘光亮  陈怀涛  乔传玲  陈化兰 《中国预防兽医学报》2006,28(1):1-5

为研究双顺反子DNA疫苗对禽流感病毒（AIV）的保护作用，将H5和H7亚型AIV的HA基因克隆到同一表达栽体上，构建了双顺反子HA基因表达质粒pCI—H5HA—H7HA。以此质粒肌注免疫4周龄SPF鸡，首次免疫后3周加强免疫，同时设pCI—H5HA和pCI—H7HA联合免疫组及空白对照组，每周采血用微量血凝抑制法检测HI抗体。加强免疫后3周分别以100LD50的高致病力禽流感病毒（HPAIV）A／Goose／Guangdong／1／96（H5N1）和A／FPv／Rostock／34〈（H7N1）进行致死性攻击。结果显示各免疫组均可刺激鸡体产生H5、H7特异性抗体，pCI—H5HA—H7HA诱导产生的抗体对H5N1和H7N1的攻毒保护分别为50%和10％，而pCI—H5HA和pCI—H7HA联合免疫的攻毒保护均为70％。表明双顺反子质粒可诱导鸡产生较好或一定的保护，但免疫效果不够理想，推测与DNA的摄取及其体内表达有关，可望通过调整DNA疫苗的多种因素提高免疫效果。  相似文献   

EAV/DNA指纹图谱条带J与OPAY02型标记对新扬州鸡体质量和生长影响的联合研究     

戴国俊  王金玉  王志跃  吴圣龙  谢恺舟  顾玉萍 《中国兽医学报》2006,26(5):563-566

随机选择新扬州鸡大型系和小型系交后代48只，联合研究EAV／DNA指纹图谱带J与OPAY02型2种分子遗传标记与新扬州鸡体质量和生长的关系，结果表明，8、10、26周龄新扬州鸡体质量在2种分子标记的不同组合间比较均存在极显著的差异，尤其是J^-S1^-S2^＋产条带组合遗传标记，8、10、26周龄新扬州鸡体质量均显著或极显著地高于其他JS1S2组合，根据数量性状多基因假说，可以推测J、S1和S2可能是影响鸡增重的多基因，2种分子遗传标记组合J^-S1^-S2^＋遗传标记有望成为鸡体质量选择的遗传标记。  相似文献